Преципитация иммунных комплексов что это

Макропролактин

Описание исследования

Данный тест предназначен для оценки количества в крови макропролактина – неактивного комплекса гормона пролактина с иммуноглобулинами. Исследование проводится методом осаждения этих комплексов (метод преципитации иммунных комплексов, ПЭГ) и сравнения концентрации активного пролактина до и после этого процесса.

В нормальном состоянии бо́льшую часть содержащегося в крови гормона составляет именно мономерный иммунореактивный пролактин, а не его соединения. Однако практика показывает, что макропролактин, накопившийся в крови в значительном количестве иногда влияет на концентрацию пролактина. Это происходит потому, что выводится комплекс из крови значительно медленнее, чем мономерный гормон, и это создает ложную предпосылку для выводов о действительном количестве пролактина. Высокий уровень макропролактина значительно реже вызывает проявление клинических симптомов гиперпролактонемии (избыточного количества пролактина) по сравнению с мономерной формой. О причинах возникновения избытка макропролактина однозначных данных нет, т.к. вопрос до конца не изучен. В общей массе людей состояние макропролактинемии встречается нечасто. В их число не входят лица, имеющие патологии и состоящие с ними на учете. Чуть больше четверти всех выявленных при лабораторном тестировании случаев избытка пролактина может возникать вследствие макропролактинемии. Процент выявленных макропролактинемий из общего количества диагностируемых гиперпролактинемий находится в зависимости от применяемых методов обследования, т.к. разные тесты проявляют неодинаковую чувствительность к пролактину. Исходя из этого, при повышенном уровне гормона рекомендуется исследовать присутствие в крови его комплексов. Дополнительное тестирование поможет снизить вероятность неправильной диагностики и лечения. Оно проводится при количестве пролактина более 700 мЕд/л. Если концентрация ниже – добавочное обследование практически теряет смысл, т.к. лабораторный опыт свидетельствует о том, что при незначительном повышении уровня пролактина сколь-нибудь значительное содержание макропролактина (больше, чем 60% от общего количества) почти не встречается. При концентрации пролактина в пределах референсных значений проводить обследование на содержание макропролактина нецелесообразно.

Подготовка к исследованию

Обследование необходимо проводить только натощак, утром, после 8-14-тичасового воздержания от приема пищи.

Перед тестированием категорически нежелательны физические (включая тренировки и секс), психологические, эмоциональные нагрузки, перегрев (посещение сауны), запрещен прием алкоголя(не менее чем за сутки).

За час до отбора крови не курить.

В течение 20-30 минут непосредственно перед забором биоматериала необходимо пребывать в спокойном состоянии.

До начала обследования проконсультироваться у лечащего врача о влиянии препаратов и лечебных процедур на его результаты и, при необходимости, временно прекратить их. При этом обращается внимание на время полувывода лекарственных средств и выдерживается пауза до полного выведения их из организма.

Кровь не рекомендуется сдавать после физиопроцедур, мануального, ультразвукового, инструментального, рентгеновского обследований, гастроскопии, кольпокопии, флюорографии и прочих манипуляций.

Показания к исследованию

Данное тестирование является дополнительным и проводится с целью:

Интерпретация исследования

Измерение производится в международных единицах на литр (мЕд/мл) или в альтернативных единицах – нанограммах на миллилитр (нг/мл).

Для пересчета единиц применяется формула: мЕд/л = нг/мл х 21.

Результат тестирования включает в себя показатель уровня пролактина, мономалекул пролактина после ПЭГ и информацию о количестве выпавшего в осадок макропролактина.

Интерпретация результата

Пролактин, референсные значения:

Макропролактин:

1. Количество присутствующего макропролактина значимо: после преципитации (реакции осаждения) иммунных комплексов антиген+антитело доля пролактина составляет меньше 40% от начального уровня.

2. Значимого количества макропролактина не обнаружено. После преципитации иммунных комплексов доля пролактина составляет более 60% от начального уровня.

3. Присутствие значимого количества макропролактина маловероятно. После преципитации иммунных комплексов доля пролактина составляет 40-60% от начального уровня.

Референсным результатом исследования макропролактина является отсутствие значимого количества.

Пролактин после ПЭГ с использованием методов Architect, Abbott, референсные значения варьируются в пределах:

Повышение концентрации гормона наблюдается:

1. При патологиях гипоталамуса:

2. При патологиях гипофиза:

3. При пониженной функциональности щитовидной железы (первичном гипотиреозе) – недостаточной выработке железой гормонов.

4. При синдроме поликистозных яичников – патологии, способной вызвать одновременное нарушение функций ряда желез, помимо яичников (поджелудочной железы, коры надпочечников, гипоталамуса, гипофиза).

5. При почечных патологиях:

6. При циррозе печени;

8. При повреждении грудной клетки.

9. При нервной анорексии (синдроме абсолютного отсутствия аппетита, расстройстве приема пищи).

10. При гипогликемии (уровне глюкозы ниже 3,3 ммоль/л), вызванной инсулином.

11. При опоясывающем лишае (опоясывающем герпесе) – вирусном заболевании, характеризующемся болезненными высыпаниями на коже.

12. При терапии следующими препаратами: циметидин, ранитидин, антипсихотические средства (нейролептики, производные фенотиазина, молиндон, локсапин, пимозин); карбидоп, эстрогены, лабеталол, метоклопрамид (при внутривенном введении или длительном оральном приеме в больших дозах), даназол, фуросемид, перидол.

Низкие значения содержания пролактина характерны:

Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже:

Ф.И.О.: Иванов Иван Иванович Пол: м Год рождения: 01.01.0000

Дата исследования: 12.12.0000

Источник

Макропролактин

Описание

Макропролактин — сопоставление уровня пролактина до и после ПЭГ-преципитации иммунных комплексов.

Пролактин в крови человека находится в нескольких фракциях, основным отличием друг от друга которых является их биологическая активность.

Мономерный пролактин у здорового человека составляет около 85% всего пролактина. Его молекулярная масса составляет 23 кДа.

Количество димерного пролактина составляет 10–15% от общего пролактина. Молекулярная масса этой фракции пролактина составляет 50 кДа.

Макропролактин (ещё называют высокомолекулярным пролактином) составляет самую малую фракцию, однако обладает самой большой молекулярной массой — 150 кДа.

Эта фракция наименее активна, по сравнению с остальными, так как молекула макропролактина представляет собой совокупность самого пролактина, а также антитела lgG. Именно из-за больших размеров макропролактин обладает ограничениями при проникновении через капиллярную сетку, а также в процессе связывания с рецептором.

Повышение концентрации макропролактина происходит в большинстве случаев вместе с повышением уровня пролактина в целом. Пятая часть всех гиперпролактинемий (заболевание, обусловленное повышенным уровнем пролактина) возникает именно из-за повышения концентрации макропролактина. Такие гиперпролактемии, часто, не обладают характерными симптомами. Сложность в диагностировании этого вида гиперпролактемий приводит к тому, что врачи проводят дополнительные анализы, позволяющие выявить значение общего пролактина.

Основная масса современные лабораторных тест-систем определяют только общее количество пролактина. То есть его изоформы не учитываются вообще. В нашей лаборатории применяется метод определения макропролактина, основанный на осаждениии иммунных комплексов с помощи PEG (полиэтиленгликоля). Если в сыворотке присутствует макропролактин, он осаждается вместе с ПЭГ, таким образом, снижая уровень общего пролактина, исходя их изменений которого, вычисляется уже концентрация макропролактина.

Исходя из того, что макропролактемия у пациентов с гиперпролактемией встречается довольно часто, определение уровня макропролактина является актуальной процедурой, даже несмотря на то, что современная медицина считает, что макропролактин пагубно не влияет на работу репродуктивной системы человека.

Интерпретация результатов
Единицы измерения: мЕд/л.
Альтернативные единицы: нг/мл.
Перевод единиц: нг/мл х 21 ==> мЕд/л.
Референсные значения — в норме присутствие значимого количества макропролактина не отмечается.
Форма представления и интерпретация результата теста на макропролактин:

результат теста на макропролактин выдаётся в виде полученного значения мономерного (пост-ПЭГ) пролактина и комментария в одном из следующих вариантов:

Источник

Пролактин (Prolactin) (+ дополнительный тест на макропролактин при результате пролактина выше 700 мЕд/л)

Полипептидный гормон, стимулирующий пролиферацию молочной железы и секрецию молока.

Пролактин вырабатывается в передней доле гипофиза, небольшое количество синтезируется периферическими тканями. При беременности вырабатывается также в эндометрии. Во время беременности пролактин поддерживает существование жёлтого тела и выработку прогестерона, стимулирует рост и развитие молочных желёз и образование молока. Это один из гормонов, способствующих формированию полового поведения. Пролактин регулирует водно-солевой обмен, задерживая выделение воды и натрия почками, стимулирует всасывание кальция. В целом пролактин активирует анаболические процессы в организме. Среди других эффектов можно отметить стимуляцию роста волос. Пролактин оказывает также модулирующее воздействие на иммунную систему.

Макропролактин – это пролактин, связанный в иммунные комплексы с антителами, присутствующий в крови в варьирующих количествах. Он выводится из крови медленней, чем мономерный пролактин и может накапливаться в высокой концентрации. Эта форма пролактина обладает меньшей биоактивностью, пациенты с высоким содержанием макропролактина могут не иметь классических симптомов, характерных для повышения концентрации пролактина.

Результаты данного исследования следует учитывать при трактовке повышенных значений показателя пролактина, расхождении результатов исследования с общей клинической картиной, отсутствии воспроизводимости при проведении исследований в разных лабораториях. Обращаем внимание на то, что выполнение исследования на макропролактин не увеличивает стоимость определения пролактина. Выявление возможного значимого присутствия макропролактина в пробах гиперпролактинемических пациентов необходимо для исключения диагностических ошибок, необходимости назначения ненужных биохимических и рентгенологических исследований, а также предотвращения неадекватной лекарственной терапии или хирургического вмешательства.

Кровь рекомендуется сдавать утром (в период с 8 до 11 часов), натощак (не менее 8 и не более 14 часов голодания, воду пить можно). Накануне избегать пищевых перегрузок.

Интерпретация результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения в Независимой лаборатории ИНВИТРО: мЕд/л.

Альтернативные единицы: нг/мл.

Перевод единиц: нг/мл х 21 ==> мЕд/л.

Референсные значения (пролактин)

Источник

Иммунологические методы исследования в лабораторной практике

Преимущества иммунологического метода исследования.

Серологические реакции различаются по способности выявлять отдельные классы антител. Реакция агглютинации, например, хорошо выявляет lgM-антитела, но менее чувствительна для определения lgG-антител. Реакции связывания комплемента и гемолиза, которые требуют участия комплемента, не выявляют антитела, не присоединяющие комплемент, например lgA-антитела и lgE-антитела. В реакции нейтрализации вирусов участвуют лишь антитела, направленные против антигенных детерминант поверхности вириона, связанных с патогенностью. Чувствительность иммунулогических методов превосходит все другие методы исследования антигенов и антител, в частности радиоиммунный и иммуноферментный анализы позволяют улавливать присутствие белка в количествах, измеряемых в нанограммах и даже в пикограммах.

С помощью предложенного способа определяют группу и проверяют безопасность крови (гепатит В и ВИЧ-инфекция). При трансплантации тканей и органов, иммунологический метод позволяет определять совместимость тканей и тестировать методы подавления несовместимости. В судебной медицине используют реакцию Кастеллани для определения видовой специфичности белка и реакцию агглютинации для определения группы крови.

Иммунологические методы широко применяют в лабораторной диагностике инфекционных болезней. Этиологию заболевания устанавливают также на основании прироста антител к возбудителю в сыворотке крови реконвалесцента по сравнению с пробой, взятой в первые дни болезни. На основе исследования изучают иммунитет населения по отношению к массовым инфекциям, например к гриппу, а также оценивают эффективность профилактических прививок.

Развитию иммунологических методов способствовало создание моноклональных антител, продуцируемых гибридомой, полученной в результате слияния иммунокомпетентной клетки В-лимфоцита и клетки миеломы мышей. Моноклональные антитела несут только одну химически однородную популяцию антител, комплементарную специфической детерминанте антигена, что позволяет осуществлять тонкую дифференциацию белков. Развитие иммунологического метода исследования идет как по линии совершенствования реагентов (чистоты антигенов и антител), так и по линии создания автоматизированных систем постановки реакций и их инструментального учета.

Виды реакций метода иммунологического исследования.

В зависимости от их механизма и учета результатов, иммунологический метод исследования можно подразделить на 5 видов реакции.

1.Реакции, основанные на феномене агглютинации.

Агглютинация представляет собой склеивание клеток или отдельных частичек — носителей антигена с помощью иммунной сыворотки к этому антигену.

Реакция агглютинации бактерий с использованием соответствующей антибактериальной сыворотки относится к наиболее простым серологическим реакциям. Взвесь бактерий добавляют к различным разведениям испытуемой сыворотки крови и через определенное время контакта при t 37° регистрируют, при каком наивысшем разведении сыворотки крови происходит агглютинация. Реакцию агглютинации бактерий используют для диагностики многих инфекционных болезней: бруцеллеза, туляремии, брюшного тифа и паратифов, бациллярной дизентерии, сыпного тифа.

Реакции агглютинации для определения группы крови и резус-фактора основаны на взаимодействии аллоантител (изоантител) и антигенов эритроцитов. Антитела против резус-фактора являются неполными, они не способны к прямой реакции с резус-положительными эритроцитами, поэтому для их обнаружения используют реакцию Кумбса, основанную на выявлении неполных антител с помощью антиглобулиновых сывороток. К эритроцитам известной специфичности добавляют исследуемую сыворотку крови, а вслед за этим антиглобулиновую сыворотку против lgG (непрямая реакция Кумбса). Fab-фрагменты неполных антител исследуемой сыворотки крови присоединяются к эритроцитам, а к свободным Fc-фрагментам этих антител присоединяются антитела против lgG, и происходит агглютинация эритроцитов.

Реакция пассивной или непрямой гемагглютинации (РПГА, РНГА). В ней используют эритроциты или нейтральные синтетические материалы (например, частицы латекса), на поверхности которых сорбированы антигены (бактериальные, вирусные, тканевые) или антитела. Их агглютинация происходит при добавлении соответствующих сывороток или антигенов. Эритроциты, сенсибилизированные антигенами, называют антигенным эритроцитарным диагностикумом и используют для выявления и титрования антител. Эритроциты, сенсибилизированные антителами, называют иммуноглобулиновыми эритроцитарными диагностикумами и применяют для выявления антигенов.

Реакцию пассивной гемагглютинации используют для диагностики заболеваний, вызванных бактериями (брюшной тиф и паратифы, дизентерия, бруцеллез, чума, холера и др.), простейшими (малярия) и вирусами (грипп, аденовирусные инфекции, вирусный гепатит В, корь, клещевой энцефалит, крымская геморрагическая лихорадка и др.), а также для определения некоторых гормонов, выявления повышенной чувствительности больного к лекарственным препаратам и гормонам, например пенициллину и инсулину.

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) основана на феномене предотвращения (торможения) иммунной сыворотки гемагглютинации эритроцитов вирусами, используется для выявления и титрования противовирусных антител. Она служит основным методом серодиагностики гриппа, кори, краснухи, эпидемического паротита, клещевого энцефалита и других вирусных инфекций, возбудители которых обладают гемагглютинирующими свойствами, например, для серодиагностики клещевого энцефалита, в лунки панели разливают двукратные разведения сыворотки больного на щелочном боратном буферном растворе. Затем добавляют определенное количество, обычно 8 АЕ (агглютинирующих единиц), антигена клещевого энцефалита и после 18 ч экспозиции при t 4° вносят взвесь гусиных эритроцитов, приготовленную на кислом фосфатно-буферном растворе. Если в сыворотке крови больного есть антитела к вирусу клещевого энцефалита, то антиген нейтрализуется и агглютинация эритроцитов не происходит.

2.Реакции, основанные на феномене преципитации.

Преципитация происходит в результате взаимодействия антител с растворимыми антигенами. Простейшим примером реакции преципитации является образование в пробирке непрозрачной полосы преципитации на границе наслоения антигена на антитело. Широко применяют различные разновидности реакции преципитации в полужидких гелях агара или агарозы (метод двойной иммунодиффузии по Оухтерлоню, метод радиальной иммунодиффузии, иммуноэлетрофорез), которые носят одновременно качественный и количественный характер. В результате свободной диффузии, в геле антигенов и антител в зоне оптимального их соотношения образуются специфические комплексы — полосы преципитации, которые выявляют визуально или при окрашивании. Особенностью метода является то, что каждая пара антиген-антитело формирует индивидуальную полосу преципитации, и реакция не зависит от наличия в исследуемой системе других антигенов и антител.

Для постановки двойной иммунодиффузии наливают слой растопленного геля на стеклянную пластинку и после затвердевания вырезают лунки диаметром 1,5–3 мм. В расположенные по кругу лунки помещают исследуемые антигены, а в центральную лунку — иммунную сыворотку известной специфичности. Диффундируя навстречу друг другу, гомологичные сыворотки и антигены образуют преципитат.

При радиальной иммунодиффузии (по методу Манчини), иммунную сыворотку вносят в агар. Антиген, помещенный в лунки, диффундирует через агар, и в результате преципитации с иммунной сывороткой, вокруг лунок образуются непрозрачные кольца, внешний диаметр которых пропорционален концентрации антигена. Метод используют для определения классов иммуноглобулинов, а модификации метода можно применять для определения противомикробных антител, относящихся к различным классам иммуноглобулинов.

Иммуноэлектрофорез основан на усилении миграции в геле антигенов и антител путем помещения пластины геля с реагентами в электрическое поле. При этом достигается разделение антигенов и антител на компоненты в соответствии с их подвижностью и зарядом.

Разновидностью иммуноэлектрофореза является радиоиммунофорез. В этом случае после электрофоретического разделения антигенов в канавку, вырезанную параллельно движению антигенов в геле, наливают сначала меченную радиоактивным йодом иммунную сыворотку против определяемых антигенов, а затем иммунную сыворотку против lgG-антител, которая преципитирует образовавшиеся комплексы антитела с антигеном. Все несвязавшиеся реагенты вымывают, а комплекс антиген-антитело обнаруживает методом авторадиографии.

3.Реакции с участием комплемента.

В качестве комплемента используют свежую сыворотку крови морской свинки, основанную на способности субкомпонента комплемента Clq и затем других компонентов комплемента присоединяться к иммунным комплексам.

Реакция связывания комплемента (РСК) позволяет титровать антигены или антитела по степени фиксации комплемента комплексом антиген-антитело. Эта реакция состоит из двух фаз: взаимодействия антигена с испытуемой сывороткой крови (исследуемая система) и взаимодействия гемолитической сыворотки с эритроцитами барана (индикаторная система). При положительной реакции в исследуемой системе происходит связывание комплемента, и тогда при добавлении сенсибилизированных антителами эритроцитов, гемолиза не наблюдается. Реакцию применяют для серодиагностики сифилиса (реакция Вассермана), вирусных и бактериальных инфекций.

Реакция радиального гемолиза эритроцитов может протекать в геле. Взвесь эритроцитов барана помещают в агарозный гель с комплементом; в застывшем на стекле слое делают лунки и вносят в них гемолитическую сыворотку. Вокруг лунок в результате радиальной диффузии антител образуется зона гемолиза, радиус которой прямо пропорционален титру сыворотки. Если сорбировать на эритроцитах какой-либо антиген, например гликопротеиновый гемагглютинин вируса гриппа, краснухи или клещевого энцефалита, то можно воспроизвести феномен гемолиза иммунными сыворотками к этим вирусам. Реакцию радиального гемолиза в геле применяют в диагностике вирусных инфекций. Она характеризуется простотой постановки, нечувствительностью к сывороточным ингибиторам, позволяет титровать сыворотки крови по диаметру зоны гемолиза, не прибегая к серийным разведениям.

Иммунное прилипание. Эритроциты, тромбоциты и другие клетки крови имеют на поверхности рецепторы к третьему компоненту комплемента (СЗ). Если к антигену (бактериям, вирусам и др.) добавить соответствующую иммунную сыворотку и комплемент, то образуется комплекс антиген-антитело, покрытый СЗ-компонентом комплемента. Эту реакцию применяют при изучении ряда вирусных инфекций (клещевого энцефалита, денге), которые сопровождаются иммунопатологическими процессами и циркуляцией в крови вирусных антигенов в комплексе с антителами.

Основана на способности антител нейтрализовать некоторые специфические функции макромолекулярных или растворимых антигенов, например активность ферментов, токсины бактерий, болезнетворность вирусов. В бактериологии эту реакцию используют для обнаружения антистрептолизинов, антистрептокиназы и антистафилолизинов. Реакцию нейтрализации токсинов можно оценивать по биологическому эффекту, так, например, титруют антистолбнячные и антиботулинические сыворотки. Смесь токсина с антисывороткой, введенная животным, не вызывает их гибели. Различные варианты реакции нейтрализации применяют в вирусологии. При смешивании вирусов с соответствующей антисывороткой и введении этой смеси животным или в клеточные культуры, патогенность вирусов нейтрализуется и при этом животные не заболевают, а клетки культур не подвергаются деструкции.

5.Реакции с использованием химических и физических меток (ИФА).

Иммунофлюоресценция заключается в использовании меченых флюорохромом антител, точнее, иммуноглобулиновой фракции антител lgG. Меченое флюорохромом антитело образует с антигеном комплекс антиген-антитело, который становится доступным наблюдению под микроскопом в УФ-лучах, возбуждающих свечение флюорохрома. Реакцию прямой иммунофлюоресценции используют для изучения клеточных антигенов, выявления вируса в зараженных клетках и обнаружения бактерий и риккетсий в мазках. Так, для диагностики бешенства, отпечатки кусочков мозга животных, подозреваемых на вирусоносительство, обрабатывают люминесцирующей антирабической сывороткой. При положительном результате, в цитоплазме нервных клеток выявляются глыбки ярко-зеленого цвета. На обнаружении антигенов вирусов в клетках отпечатков со слизистой оболочки носа основана экспресс-диагностика гриппа, парагриппа и аденовирусной инфекции.

Более широко применяют метод непрямой иммунофлюоресценции, основанный на выявлении комплекса антиген-антитело с помощью люминесцирующей иммунной сыворотки против lgG-антител и используемой для обнаружения не только антигенов, но и титрования антител. Метод нашел применение в серодиагностике герпеса, цитомегалии, лихорадки Ласса. Препараты с наслоенной исследуемой сывороткой крови помещают в термостат при t 37° для образования иммунных комплексов, а затем, после отмывания несвязавшихся реагентов, выявляют эти комплексы меченой люминесцирующей сывороткой против глобулинов человека. Применяя меченые иммунные сыворотки против lgM- или lgG-антител, можно дифференцировать тип антител и обнаруживать ранний иммунный ответ по наличию lgM-антител.

Иммунофлюоресценцию широко используют не только в бактериологии, вирусологии, паразитологии, но и в иммунопатологии для обнаружения антител к тканевым антигенам человека.

Иммуноферментные или энзим-иммунологические методы основаны на использовании антител, конъюгированных с ферментами, главным образом пероксидазой хрена или щелочной фосфатазой. Чтобы обнаружить соединение меченых антител с антигеном, добавляют субстрат, разлагаемый присоединенным к lgG ферментом, с окрашиванием в желто-коричневый (пероксидаза) или желто-зеленый (фосфатаза) цвет. Используют также ферменты, разлагающие не только хромогенный, но и люмогенный субстрат. В этом случае при положительной реакции появляется свечение. Подобно иммунофлюоресценции, иммуноферментный метод применяют для обнаружения антигенов в клетках или титрования антител на антигенсодержащих клетках.

Наиболее популярной разновидностью иммуноферментного метода является иммуносорбция. На твердом носителе, которым могут быть целлюлоза, полиакриламид, декстран и различные пластмассы, сорбируют антиген. Чаще носителем служит поверхность лунок микропанелей. В лунки с сорбированным антигеном вносят исследуемую сыворотку крови, затем меченую ферментом антисыворотку и субстрат. Положительные результаты учитывают по изменению цвета жидкой среды. Для обнаружения антигенов, на носитель сорбируют антитела, затем вносят в лунки исследуемый материал и проявляют реакцию меченой ферментом антимикробной сывороткой. Повышению чувствительности иммунофлюоресцентного и иммуноферментного методов способствует введение в систему реакции авидина и биотина.

Радиоиммунологический метод основан на применении радиоизотопной метки антигенов или антител. Является наиболее чувствительным методом определения антигенов и антител, используется для определения гормонов, лекарственных веществ и антибиотиков, для диагностики бактериальных, вирусных, риккетсиозных, протозойных заболеваний, исследования белков крови, тканевых антигенов. Первоначально он был разработан как специфический метод измерения уровня циркулирующих в крови гормонов. Тест-системой являлись меченый радионуклидом гормон (антиген) и антисыворотка к нему. Если к такой антисыворотке добавить материал, содержащий искомый гормон, то он свяжет часть антител, при последующем внесении меченого титрованного гормона с антителами свяжется уменьшенное по сравнению с контролем его количество. Результат оценивают по сопоставлению кривых связанной и несвязанной радиоактивной метки. Эта разновидность метода носит название конкурентной реакции. Существуют и другие модификации радиоиммунологического метода.

Иммуногистологические методы предназначены для определения антигенов на поверхности или внутри клетки, например для обнаружения маркеров лимфоцитов и иммунокомплексов при гломерулонефритах и других заболеваниях почек. В этой реакции для выявления антигенов пользуются или иммунофлюоресценцией, или иммуноферментными конъюгатами с пероксидазой. Количество специфических антигенов определяют по интенсивности окрашивания. Иногда используют автоматическую регистрацию с помощью спектрофотометра.

Источник

• таракан на теле примета →